从大肠杆菌溶血磷脂酶L1 k - 12过度生产。
文章的细节
-
引用
复制到剪贴板 -
Homma Karasawa K,奖赏我,小林T H,千叶N,水岛H,井上K, Nojima年代
从大肠杆菌溶血磷脂酶L1 k - 12过度生产。
109年2月。1991;(2):288 - 93。
- PubMed ID
-
1864840 (在PubMed]
- 文摘
-
900大肠杆菌菌株进行筛选后的克拉克和碳收集的溶血磷脂酶L1活动,我们分离克隆的质粒pLC6-34,显示增加的溶血磷脂酶L1活动水平。菌株的质粒pC124, subclone pLC6-34在质粒向量pUC8,显示大约11.4倍溶血磷脂酶L1活动比父母的压力。从这些高产菌株,溶血磷脂酶L1是纯化近乎均匀的连续使用硫酸铵分馏,Sephacryl s - 300, deae纤维素、羟磷灰石和Sephacryl s - 200列色谱法。纯化的表观分子量溶血磷脂酶L1估计是20500 - 22000年通过SDS-polyacrylamide凝胶电泳和凝胶渗透色谱法。的具体活动均匀溶血磷脂酶L1 10400 nmol /分钟/毫克蛋白1-acyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine作为底物时。伴的氨基酸序列的部分纯化溶血磷脂酶L1决定,不同溶血磷脂酶L2,此前从信封的大肠杆菌菌株纯化轴承其克隆结构基因,pldB [Karasawa K。、奖赏我。小林,T。Sa-eki, T。井上,K。& Nojima s . j .生物化学(1985),98年,1117 - 1125]。溶血磷脂酶L1基因负责生产过剩的活动被指定为pldC(磷脂降解C)。它的限制性内切酶图谱克隆pldB也不同。这些结果进一步证实,在大肠杆菌中,溶血磷脂酶有两种截然不同的特色。