功能催化三分子的作用和oxyanion hole-forming残留酶活性的大肠杆菌thioesterase我/蛋白酶/磷脂酶L1。
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李LC,李YL、低浓缩铀RJ肖摩根富林明
功能催化三分子的作用和oxyanion hole-forming残留酶活性的大肠杆菌thioesterase我/蛋白酶/磷脂酶L1。
j . 2006 7月1;397 (1):69 - 76。
- PubMed ID
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16515533 (在PubMed]
- 文摘
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大肠杆菌利用(thioesterase我,EC 3.1.2.2)是一种多功能酶与thioesterase、酯酶、芳香酯、蛋白酶和溶血磷脂酶的活动。以前晶体结构分析发现其必需氨基酸残基,形成一个催化三分子(Ser10-Asp154-His157)和那些参与形成一个oxyanion洞(Ser10-Gly44-Asn73)。看透每个残留的生化作用,定点诱变来改变这些残留丙氨酸,和酶动力学研究进行了使用酯酶,thioesterase amino-acid-derived基质。残留的His157是最重要的,因为它催化三分子起着至关重要的作用,也可以扮演一个角色在稳定oxyanion构象。Ser10也起着非常重要的作用,虽然小的剩余活动S10A变异表明,水分子可以作为一个可怜的替代品。水分子可能具有nucleophilic-attacking字符由His157氢键。Asp154没有必要与其他两个三合会的残留物。它靠近衬底隧道的入口,因此主要影响基质的可访问性。Gly44扮演了一个角色在稳定oxyanion中间,另外acyl-enzyme-intermediate转换。N73A残余酶活力最高的突变体,这表明Asn73并不像其他突变残留物一样重要。 The role of Asn73 is proposed to be involved in a loop75-80 switch-move motion, which is essential for the accommodation of substrates with longer acyl-chain lengths.