基因的克隆、序列分析和表达II级果糖1,6-bisphosphate醛缩酶的大肠杆菌。
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Alefounder公关,鲍德温SA Perham RN,短的新泽西
基因的克隆、序列分析和表达II级果糖1,6-bisphosphate醛缩酶的大肠杆菌。
j . 1989 1月15,257 (2):529 - 34。
- PubMed ID
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2649077 (在PubMed]
- 文摘
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核苷酸序列分析大肠杆菌染色体DNA插入的质粒pLC33-5克拉克和碳库(克拉克&碳(1976)细胞9,91 - 99]揭示基因的存在,fda,编码类II (metal-dependent)果糖1,6-bisphosphate醛缩酶的大肠杆菌。多肽链的一级结构推断fda DNA序列的基因由359个氨基酸组成,包括启动蛋氨酸残渣,先生39146可以计算。这个值是在良好的协议与40000年预估的钠十二烷基sulphate-polyacrylamide凝胶电泳纯化二聚的酶。类的氨基酸序列二醛缩酶的大肠杆菌没有已知的氨基酸序列的同源性类我(imine-forming)果糖1,6-bisphosphate醛缩酶从各种各样的来源。另一方面,有明显的同源性的氨基端序列40残留已经建立了二类果糖1,6-bisphosphate醛缩酶的酿酒酵母。这些类二醛缩酶,从原核生物和真核生物,显然是结构和相关的进化。1029年bp-fragment DNA结合fda从质粒基因切除pLC33-5用限制性内切核酸酶消化HaeIII和subcloned表达质粒pKK223-3,基因的tac启动子的控制下。在诱导物的存在isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside,这种重组表达质粒转化的大肠杆菌JM101细胞生成的II级果糖1,6-bisphosphate醛缩酶约。可溶性蛋白的70%。这个异常高表达的大肠杆菌基因应该大大促进酶的纯化未来任何结构或机械的研究。