调整和功能比较纯化GlpF AqpZ,从大肠杆菌甘油和水通道。
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Borgnia MJ,阿格雷P
调整和功能比较纯化GlpF AqpZ,从大肠杆菌甘油和水通道。
《美国国家科学院刊S a . 2001年2月27日,98 (5):2888 - 93。Epub 2001 2月20。
- PubMed ID
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11226336 (在PubMed]
- 文摘
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一个大家庭的膜通道蛋白的选择性运输水(水通道蛋白)或加甘油aquaglyceroporins(达到)被发现在不同的生命形式。大肠杆菌有两个成员,这个家庭的水通道,AqpZ,和一个甘油的主持人,GlpF。尽管类似的主要氨基酸序列和预测结构,低聚物的状态和溶质AqpZ选择性和GlpF是有争议的。我们在这里报告生化和功能特征的affinity-purified GlpF AqpZ和比较。Histidine-tagged (His-GlpF)和hemagglutinin-tagged bicistronic构造(HA-GlpF)编码多肽的表达的细菌。HA-GlpF和His-GlpF似乎形式在Ni-nitrilotriacetate亲和纯化低聚物。蔗糖梯度沉积的低聚物的状态分析表明,辛基glucoside-solubilized GlpF变化:低离子强度有利于亚基解离,而镁(2 +)稳定四聚物的组装。调整的affinity-purified GlpF甘油proteoliposomes增加渗透率超过100倍,透水性高达10倍而控制脂质体。甘油和水的渗透性GlpF发生的阿伦尼乌斯活化能较低和可逆地抑制了HgCl (2)。与AqpZ不同,我们的研究表明,四聚物water-selective稳定,净化GlpF nondenaturing条件下存在多个低聚物的形式和甘油高度渗透但不被水渗透。