重组大肠杆菌的表达、纯化和表征5 '磷酸吡哆醇氧化酶。
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赵Di齐鸣,杨E, G,温克勒我,Schirch V
重组大肠杆菌的表达、纯化和表征5 '磷酸吡哆醇氧化酶。
蛋白质Expr Purif。1998年8月,13 (3):349 - 56。
- PubMed ID
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9693059 (在PubMed]
- 文摘
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以前克隆pdxH从大肠杆菌编码基因5 '磷酸吡哆醇氧化酶被转移到一家pET22b向量和大肠杆菌表达HMS174 (DE3)细胞。可溶性过表达酶迅速在高收益使用两种色谱柱纯化全面净化约2.8倍。纯化酶含有FMN联系紧密。酶表现出相同的光谱特性和类似的动力学常数g .赵和之前报道的m E。温克勒(j . Bacteriol。177、883、1995),但不同于其他调查人员报告的属性。快速程序开发准备apoPNP牛在高收益。全和酶蛋白为。蛋白质的摩尔absorbtivity系数确定完全活跃apoPNP牛的氨基酸组成。使用这个值和绑定FMN的光谱特性显示了三种不同的方法,包含两个二聚的酶分子二聚体,而不是一个FMN人均FMN之前报道。