克隆和表达结核分枝杆菌和麻风杆菌dihydropteroate合酶在大肠杆菌。
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Nopponpunth V, Sirawaraporn W,格林PJ,桑蒂DV
克隆和表达结核分枝杆菌和麻风杆菌dihydropteroate合酶在大肠杆菌。
J Bacteriol。1999年11月,181(21):6814 - 21所示。
- PubMed ID
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10542185 (在PubMed]
- 文摘
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dihydropteroate合成酶基因的结核杆菌、麻风杆菌基因组DNA的孤立与探针杂交放大库。DNA测序显示840个基点的开放阅读框编码280个氨基酸的蛋白质结核分枝杆菌dihydropteroate合成酶和852 bp的开放阅读框编码284个氨基酸的蛋白质麻风杆菌dihydropteroate合成酶。dihydropteroate合成酶的表达控制的T5发起人dihydropteroate synthase-deficient的大肠杆菌菌株。使用三个色谱步骤,我们纯化结核分枝杆菌和麻风杆菌dihydropteroate合成酶同质性> 98%。钠十二烷基sulfate-polyacrylamide凝胶电泳显示对结核分枝杆菌的分子质量29 kDa dihydropteroate合成酶和30 kDa麻风杆菌dihydropteroate合成酶。凝胶过滤两种酶显示ca的分子质量。60 kDa,表明本机酶存在两个相同的亚基的二聚体。稳态动力学参数dihydropteroate合成酶结核分枝杆菌和麻风杆菌测定。代表磺酰胺类和氨苯砜的分枝杆菌dihydropteroate合成酶的抑制剂,但抗细菌剂p-aminosalicylate,一个假定的dihydropteroate合酶抑制剂,是一个可怜的抑制剂的酶。