生产N-acetyl-D-neuraminic酸通过重组整个细胞表达项圈藻sp。CH1 N-acetyl-D-glucosamine 2-epimerase和大肠杆菌N-acetyl-D-neuraminic酸裂解酶。

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李YC,简HC,许WH

生产N-acetyl-D-neuraminic酸通过重组整个细胞表达项圈藻sp。CH1 N-acetyl-D-glucosamine 2-epimerase和大肠杆菌N-acetyl-D-neuraminic酸裂解酶。

生物科技J》。2007年5月1日,129 (3):453 - 60。Epub 2007 2月9。

PubMed ID

17349707 (在PubMed

]

文摘

N-acetyl-d-neuraminic酸(NeuAc;唾液酸)是一种前体制造许多药物,如抗流感病毒药物。NeuAc生产,开发一个完整的细胞过程的基因项圈藻sp。CH1 N-acetyl-d-glucosamine 2-epimerase(包心菜)和大肠杆菌N-acetyl-d-neuraminic酸裂解酶(娜娜)克隆和表达在大肠杆菌BL21 (DE3)。的表达bGlcNAc 2-epimerase从原油细胞提取纯化IPTG-induced大肠杆菌BL21 (DE3)由nickel-chelate色谱(pET-bage)同质性。纯化的分子质量bGlcNAc 2-epimerase决心42 kda的sds - page。pH值和温度最适条件的重组bGlcNAc 2-epimerase pH值7.0,50摄氏度,分别,只需要20妈妈ATP最大活动。的具体活动bGlcNAc 2-epimerase (124 umg(1)蛋白质)转换的N-acetyl-d-glucosamine N-acetyl-d-manosamine约4倍高于猪N-acetyl-d-glucosamine 2-epimerase。激起了玻璃容器包含转化大肠杆菌细胞基因表达年龄项圈藻sp。CH1和NeuAc裂合酶基因在大肠杆菌NovaBlue分别被用于转换GlcNAc和NeuAc丙酮酸。最大生产力10.2 gneuacl (1) h(1)转换为33.3%收益率从GlcNAc可以获得12 h反应。重组大肠杆菌细胞可以重用已有8个周期的效率> 8.0 gneuacl (1) h (1)。 In this process, the expensive activator, ATP, necessary for maximal activity of GlcNAc 2-epimerase in free enzyme system can be omitted.

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药物靶点

药物	目标	类	生物	药理作用	行动
N-Acetylglucosamine	N-acylglucosamine 2-epimerase	蛋白质	人类	未知的	不可用	细节