单胺氧化酶A和B的定点诱变:半胱氨酸的角色。
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吴高频,陈K, Shih JC
单胺氧化酶A和B的定点诱变:半胱氨酸的角色。
摩尔杂志。1993年6月,43 (6):888 - 93。
- PubMed ID
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8316221 (在PubMed]
- 文摘
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九个半胱氨酸在推导氨基酸序列的人类肝脏单胺氧化酶(MAO)——缺氧。这些半胱氨酸残基的作用是和定点诱变- b催化活性进行了研究,即每个半胱氨酸残基转换为丝氨酸。野生型和突变体的互补,是暂时性的转染COS细胞和化验是和- b催化活性使用5 -羟色胺[3 h]和[14 c]苯乙胺,分别为基质。催化活动是保留在七是半胱氨酸丝氨酸突变体(突变残留165,210,266,306,321,323和398年)和六个缺氧半胱氨酸丝氨酸突变体(突变残留5,172,192,297,312和389年)。动力学参数(公里)野生型酶的突变体也类似,这表明这些半胱氨酸酶活性所必需的。替换是半胱氨酸- 374和-406缺氧半胱氨酸- 156年,-365年和-397年与丝氨酸导致完全丧失的是和- b催化活性。催化活性的损失不是由于成功转染的突变体,所表示的北部污点或免疫印迹分析。催化活性的丧失是ser - 406和缺氧ser - 397突变体可能是由于预防辅因子的酶的共价结合时尚,这对催化活性是必需的。催化活性的丧失是ser - 374和缺氧ser - 156年和-365年表明,这些半胱氨酸对催化活性很重要,但他们是否参与形成了活跃的站点或重要的是适当的构象和- b仍有待研究。